proteomics는 생명 활동의 기전과 proteome의 수준으로부터 질병 발생의 분자 메커니즘을 더 잘 이해하고, proteomics의 연구에서 단백질 추출은 가장 기본적이고 가장 중요한 측면 중 하나이다. 트리스는 식물 단백질 추출 실험에서 공통적 인 작용제이며, 그 방법은 tris-hcl, 트리스 - 페놀, 트리스 - 아세톤 - 페놀을 포함한다. 이 방법은이 기사에서 요약 될 것이다.

트리스 - hcl

단백질 추출에 대한 tris-hcl의 효과는 tca- 아세톤의 효과보다 낫다. 단백질의 tca-acetone 추출은 작은 분자량 영역에서 고르지 않고 단백질 반점이 명확하지 않고 수평 줄무늬와 수직 줄무늬가 비교적 심각한 반면 tris-hcl은 위의 단점을 극복하고 tca로 분리하기 어려운 산성 단백질을 분리합니다 - 아세톤 방법. 더 적당한 분자량 단백질의 분리에 더하여, tris-hcl은 또한 많은 고 분자량 및 저 분자량 단백질을 얻을 수있다.

tris-hcl 방법은 짧은 추출 시간, 적당한 비용, 간단한 추출 단계, 적은 단백질 손실 및 재현 가능한 실험 결과의 이점을 갖는다.

트리스 - 페놀

트리스 - 페놀은 트리스 포화 페놀의 특성을 이용한다 : 페놀은 단백질의 좋은 용매이며, 단백질, 지질은 시료 제조시 페놀에 용해된다. 반면에 소금, 핵산, 폴리 페놀 및 다당류 및 기타 가용성 물질은 수상 단계; 원심력 및 원심 분리 시간을 증가시킴으로써, 가능한 한 상청액의 상층에 당의 밀도를 남길 수있다; 단백질은 페놀 상에 암모늄 아세테이트의 메탄올 용액을 통해 침전 될 수 있고, 차가운 아세톤으로 단백질을 여러 번 세척하고, 안료와 암모늄 이온 및 기타 불순물을 제거 할 수있다.

이 방법은 대량의 방해 물질을 함유 한 식물 샘플을 취급하는 데 매우 효과적이지만 비교적 복잡하고 시간이 많이 소요됩니다.

트리스 - 아세톤 - 페놀

단백질 추출을위한 tca- 아세톤과 트리스 - 페놀의 조합은 tca- 아세톤 침전 및 트리스 - 페놀의 장점을 가지고있다. 잔류 tca를 아세트산 암모늄을 함유하는 메탄올 용액으로 먼저 세척하고 용액의 pH를 7.0 이상으로 조절하고, 페놀과 sds의 혼합물을 사용하여 단백질을 용해시킨다. 페놀 - sds 결합 추출은 페놀, sds 버퍼 추출 단독보다 효과적입니다. 트리스 - 아세톤 - 페놀 방법은 많은 식물의 단백질 추출에서 매우 좋은 결과를 얻었으며, 전기 영동 패턴의 배경과 스트립은 매우 명확하며 식물 잎과 과일 단백질 추출에 널리 사용될 수 있습니다.

추출 방법은 매우 시간이 절약됩니다, 총 추출 시간은 약 1h, 크게 기존의 방법보다.