식품 또는 사료 성분의 단백질은 종종 가공 공정 중 열처리 또는 화학 반응으로 인해 구조 및 용해도가 변하여 용해성이 불량합니다.

국가 표준에 개시된 단백질 검출 방법은 주로 젤 달법, 분광 광도법 및 연소법의 3 가지 종류를 포함한다. 생화학 실험실에서는 biuret 방법, bca 방법, coomassie blue 방법, lowry 방법 및 자외선 방법도 종종 사용됩니다. 세부 내용은 다음과 같습니다.

표 1. 단백질 검출 방법

따라서 측정 결과의 정확성을 보장하고 측정 시간이 짧고 적용 가능한 측정 대상 범위가 넓은 분석법 개발이 시급히 필요합니다 (특히 샘플의 단백질 함량을 측정하는 데 직접 사용할 수 있음) 난 용성 단백질 함유).

연구자들은 다음 단계를 포함하여 새로운 방법을 개발했다.

(1) 시약 a : 물에 선형 나트륨 알킬 설페이트 및 수산화 나트륨을 각각 45 ~ 100 mm 및 150 ~ 300 mm의 몰 농도로 용해시키는 단계; 시약 b : 5 내지 10 mm, 15 내지 30 mm 및 150 내지 750 mm의 몰 농도로 물에 용해되는 황산구리 또는 수화 된 황산구리, 타르타르산 나트륨 및 수산화 나트륨;

(2) 샘플 준비 : 단백질이없는 물 또는 완충액을 블랭크 샘플로 사용; 소 혈청 알부민을 물에 녹이거나 3- 모르 폴린 프로판 술폰산 (mops) 완충제 및 단백질의 농도를 조정함으로써, 표준 단백질 샘플로서 0.2 mg / ml 내지 30 mg / ml 범위의 단백질 농도를 갖는 일련의 용액을 수득하는 단계; 시험 될 단백질-함유 물질을 물 또는 완충액에 분산시키고, 선택적으로 희석 처리에 의해 시험 될 샘플을 제조하는 단계;

(3) 시약 a를 블랭크 샘플, 표준 단백질 샘플 및 시험 될 샘플과 각각 혼합하여 상응하는 시약을 수득하는 혼합물을 수득하며, 여기서 시약 중의 단백질 함량은 시험 될 샘플의 혼합물과 선형 범위 요구 사항. 각각의 시약 혼합물을 90 내지 100 ℃의 온도에서 수조에서 가열 한 다음, 실온으로 냉각시키고;

(4) 각각의 시약 혼합물을 시약 b와 혼합하여 상응하는 시약 b 혼합물을 수득하고, 각 시약 b 혼합물을 수욕에서 50 내지 70 ℃의 온도에서 가열하고, 실온으로 냉각시키는 단계;

(5) 냉각 블랭크 샘플의 시약 b 혼합물을 기준으로하여 각각의 시약 b 혼합물을 여과하고, 냉각 된 표준 단백질 샘플의 시약 b 혼합물 및 시험 될 샘플의 시약 b 혼합물을 540 nm에서 측정하는 단계 분광 광도계를 사용합니다.

(6) 준 단백질 샘플의 단백질 함량에 따라, 단백질 함량과 흡광도 사이의 관계는 선형 피팅에 의해 얻어지고, 시험 될 샘플의 단백질 함량은 계산된다.

단백질 검출 방법은 더 짧은 검출 시간을 필요로하고, 불용성 단백질의 용해도를 증가 시키며, 광범위한 응용, 정확한 측정 결과, 넓은 선형 범위, 높은 감도, 높은 정밀도 및 우수한 재현성을 갖는다. 또한이 테스트 방법은 처리량이 많은 측정 액세서리 및 장비와 호환되며 대량의 샘플을 신속하게 감지 할 수있어 대규모 산업 공정에 더 적합합니다.

참고

단백질 검출 방법 및 단백질 검출 키트. cn105987884b, 2015-03-03.

에 의해 편집 소주 야쿠 과학 공동., LTD.