트리스 (하이드 록시 메틸) 아미노 메탄(트리스)는 트로 메타 민이라고도 알려져 있으며 생물학적 제제의 생산에서 생물학적 완충제로 흔히 사용되는 약한 염기이다. 그것은 저혈당, 저혈압, 메스꺼움, 구토, 과도한 섭취 또는 신장 부족을 유발하여 알칼리 혈증을 유발할 수 있으며 호흡을 억제하고 호흡을 멈출 수도 있습니다. 그러므로 생물학적 제제의 트리스 함량을 시험 할 필요가있다. 그럼 어떻게 감지 할 수 있을까요?

현재, 트리스의 정량적 검출은 주로 산 염기 적정법을 채택하고 있지만, 정량적 한계는 높고, 다양한 산성 염기 군의 간섭을 받기 쉽다. 생물학적 생성물은 다량의 카르복시기, 아미노기 및 음이온 및 양이온을 함유하므로, 생성물 중의 트리스는 적정에 의해 정량적으로 검출 될 수 없다.

상기 문제점을 해결하기 위해, 연구원들은 [1]트리스 완충기이온 크로마토 그래피에 의한 생물학적 제제에서의 특정 단계는 다음과 같다 :

(1) 주 사용 물을 생물학적 동결 건조 제품에 첨가하여 용해 및 여과하거나 생물학적 수용액을 직접 여과 한 다음 여액을 시험 용액으로 취한다. 트리스를 주입 용 물에 첨가하여 용해시키고, 농도 구배를 가한 후에 상이한 농도의 용액을 대조 용액으로서 수득한다;

(2) 펄스 암페어 측정기 및 후 컬럼 보충 방법이 사용된다. 칼럼은 1ml / 분의 유속으로 40mmol / l 메탄 술폰산 용액의 이동상을 갖는 cs16 양이온 교환 칼럼이었다. 칼럼 후 보충은 0.3 밀리몰 / 분의 유속으로 500 밀리몰 / ℓ의 농도의 수산화 나트륨 또는 수산화 칼륨의 알칼리 용액이었고;

(3) 정량 분석은 외부 표준 방법을 사용하여 준비한 다양한 농도의 표준 용액을 시험하고 표준 곡선의 회귀 방정식을 얻기 위해 트리스의 농도 - 피크 면적 표준 곡선을 그린다. 샘플 용액을 동일한 조건 하에서 시험하고, 상기 회귀 방정식에 의해 시험 샘플 중의 트리스의 함량을 계산 하였다.

검출 한계는 3.14 × 10-5mmol / ℓ, 정량 최소 한계는 1.05 × 10-4mmol / ℓ, 회수율은 93.8 % ~100.1 %, 재현성 범위는 0.10 % ~0.22 %이다. (rsd, n = 5).

전통적인 산 염기 적정법에 비해이 방법은 검출 한계가 낮고 정량 한계가 낮으며 단백질에 담지 된 산성 염기 군에 의해 방해받지 않고 시료의 음이온 및 양이온과 간섭하지 않으며 유도체 화 및 복잡한 시료 준비가 필요 없습니다. 그것은 트리스 (카스 77-86-1)를 가지며, 우수한 선택성을 가지며, 트리스 보유 시간 영역에서 다른 피크 간섭을 갖지 않는다. 검출 감도가 높으며 분석 속도가 빠르며 관련 산업의 생물 의약품에 함유 된 트리스의 내용물 검출 및 품질 평가에도 적용 할 수 있습니다.

참고

[1] yu xiaoping, yu jin. 이온 크로마토 그래피에 의한 생물학적 생성물의 트리스 결정 방법. 2018, cn107782829a.