분자 생물학의 실험에서, 단백질 발현 유도제 모든 사람에게 새로운 것은 아니다. 그것은 lac operon의 전사를 촉발시키고, 그 유전자가 lac operon의 통제하에있는 단백질 발현을 유도하는 allolactose의 분자 모방 물이다.

하지만 iptg ( 이소 프로필 β-d-1- 티오 갈 락토 피 라노 시드 ), 더 높은 농도가 항상 더 낫습니까?

먼저 iptg의 유도 원리를 살펴 보겠습니다.

원핵 생물의 대다수 유전자는 기능적 관계에 따라 집단으로 배열되어 염색체에 집중되어 전사 단위 인 오페론을 형성한다. e. 콜라이는 β- 갈 락토시다 아제, 투과 효소 및 트랜스 아세틸 라아 제를 각각 코딩하는 세 개의 구조 유전자 z, y 및 a를 포함한다. 또한, 조작 유전자 (조작자), 시작 서열 p (프로모터); (lac repressor를 암호화하는) i는 유당 오페론에 속하지 않습니다.

이 오페론 시스템에서 실제 유도자는 유당이 아닙니다. 락토오스는 세포로 들어가고 β- 갈 락토시다 아제에 의해 알로 락토오스 - 생리학 유도제로 촉매 작용을한다. 실험에서, iptg ( 이소 프로필 글루코시 놀 레이트 갈락 토즈 글루코 시드 )는 세균 대사에 영향을받지 않는 강력한 유도제이며 매우 안정하기 때문에 널리 사용됩니다.

위의 질문으로 돌아갑니다 : iptg의 농도가 더 높을수록 좋습니다?

대답은 정말로 아닙니다!

(2) 일반적으로 우리는 가용성 단백질이 가능한 한 많이 발현 될 수 있기를 희망한다. 반면에 iptg 농도가 너무 높으면 수용체 단백질의 양이 줄어들면 많은 수의 inclusion이 형성 될 것이다.

그러므로 iptg의 가장 적절한 농도는 종종 높지 않습니다.

표적 유전자의 발현 수준은 유도 물질 농도, 유도 온도, 유도 시간 등과 같은 인자에 의해 영향을 받는다. 그러므로 알려지지 않은 단백질에 대한 발현 및 정제에서 유도 인자 iptg의 농도를 포함한 관련 요인을 연구하는 것이 가장 좋습니다 ( 캐스 367-93-1 ), 최적의 실험 결과를 얻기위한 적절한 조건을 선택하기 위해.