Tricine (CAS: 5704-04-1 )은 우수한 양쪽성 생물학적 제품의 완충액입니다. Tricine의 주요 목적은 그람양성균, 그람음성균, 효모 및 곰팡이를 효과적으로 억제하는 것이며 많은 백신 배양 배지의 pH 안정제이기도 합니다. 광견병 백신에 대한 Tricine의 적용은 CN111840535B 특허에 소개되어 있으며, 여기서 Tricine은 주로 PH 값 안정화제로 사용되는 무혈청 배양 배지의 구성 요소입니다. 이번 주 YACOO 에디터는 광견병 백신의 구체적인 준비 과정을 소개했습니다. 구체적인 프로세스는 다음과 같습니다.

1. 원액의 준비

(1) 세포 배양: Vero 세포는 생물 반응기의 무혈청 배지에서 0.6~0.7 × 10 ⁷ 세포/ml로 관류되고, 바이러스 접종을 시작하며, Vero 세포 무혈청 배양 배지는 2 ~ 4mmol/L 글루타티온, 0.5 ～2.0g/L 과당 및 0.5 ～2.0g/L 트리신.

(2) 바이러스 접종: 광견병 바이러스 rPV-2061을 세포에 0.0025-0.01 MOI로 접종하고 6시간 이상 배양한다. 관류 배양을 위해 무혈청 바이러스 유지 용액을 사용하기 시작합니다. Vero cell 무혈청 유지 용액의 공식은 2 ～4mmol/L 글루타티온, 0.5 ～2.0g/L 과당, 0.5 ～2.0g/L 트리신 및 2 ～3g/L 중탄산나트륨을 포함합니다.

(3) 바이러스 수집: 바이러스 접종 후 3-17일 사이에 바이러스를 수집하고 바이러스 수집액을 얻습니다.

(4) 불활성화: β -Lactone을 사용하여 바이러스를 불활성화합니다.

(5) 효소 분해: Vero 세포의 숙주 DNA를 뉴클레아제로 분해합니다.

(6) 정제: 분자체 크로마토그래피로 바이러스를 정제한다. 정제 후 안정제로 3%(m/v) 인간 혈청 알부민과 5%(m/v) 말토오스를 첨가하여 원래 용액을 준비합니다.

2. 완제품 준비

( 1 ) 안정제로 동결건조 보호제를 적당량 첨가하여 반제품을 얻는다.

（2 ） 반제품은 소포장 및 동결건조 후 완제품으로 준비됩니다.

특허에 기재된 광견병 백신 제품은 소혈청, 동물유래 트립신, 젤라틴, 덱스트란 등의 첨가물이 없고, 베로세포 내 DNA 및 단백질 잔기가 적고 안전성이 높다. 또한 백신 제품의 역가는 높은 열 안정성으로 37 ℃ 에서 28일 후에도 여전히 6.6IU/dose 이상으로 유지될 수 있습니다 . 또한 30L 생물 반응기의 각 탱크는 높은 공정 생산 효율로 160,000개의 제제를 생산할 수 있습니다.

참조

CN111840535B 무혈청 Vero 세포와 광견병 바이러스 rPV-2061을 사용한 광견병 백신의 제조.