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ecl, nbt / bcip 및 dab의 차이점 2017-11-10 10:55:14

ecl, dab 및 nbt / bcip 표색계 메소드 (ihc), 면역 세포 화학 (icc) 및 웨스턴 블랏 (wb)과 같은 생화학 실험에 매우 일반적으로 사용됩니다.


그들 사이의 차이점은 무엇입니까?



ecl - 향상된 화학 발광


ecl은 일반적으로 luminol, h2o2, 발광 촉진제 및 기타 물질을 포함합니다. luminol은 hrp 및 h2o2에 의해 산화되어 형광을 생성하며,이 과정은 발광 강화제에 의해 향상된다.



(1) 빛에 민감해야하고, (2) 발광 안정성이 있어야하며, (3) 배경이 낮거나 배경이 없어야한다.


dab - 3,3'- 디아 미노 벤지딘



dab는 h2o2 존재 하에서 전자를 잃고 황색 불용성 생성물을 형성하는 색 변화 및 축적을 나타내는 퍼 옥시다아제의 발색 기질이다. 반응은 다음과 같다.


hrp + h 2 영형 2 + dab → hrp + h 2 o + 산화 된 dab ↓


방법은 좋은 특이성, 안정된 성능 및 편리한 조작의 이점을 갖는다. 그것은 단백질 혼성화 및 면역 화학에 적합합니다.


bcip-- 5- 브로 모 -4- 클로로 -3- 인돌 릴 포스페이트



nbt / bcip은 알칼리성 인산 가제 (alkaline phosphatase, ap)에 대한 최상의 기질 조합 중 하나입니다. ap의 촉매 하에서 bcip은 가수 분해되어 강한 반응성 생성물을 생성하며, 이는 nbt와 반응하여 진한 청색 내지 청자색의 화학 물질을 형성한다. 이 키트는 알칼라인 포스파타제 시스템에서의 ihc 및 wb 실험의 효소 착색에 사용될 수있다.


표 1. 대응하는 효소 및 ecl, nbt / bcip 및 dab의 반응

분류
효소 이자형
천연색
이자형 실험
ec
hrp
형광
화학 발광 검출
소량
hrp
탠 껍질
단백질 하이브리드 idisation 및 immunochemistry, peroxidase 방법 (enzyme linked immunosorbent assay, pap method 등)
nbt / bcip
ap
진한 파란색에서 파란색 - 보라색
알칼리 중 ihc 및 wb 네 포스파타제 시스템

요약하면, ecl과 dab은 hrp의 기판이지만 nbt / bcip ( cas 6578-06-9 )가 있습니다. 세 가지 색상이 다르게 보입니다. 감도에서 ecl은 1 ~ 5pg의 최고 감도를 가지며 심지어 fg 수준에 도달하고 bcip / nbt는 100pg이며 감마는 가장 낮은 감도를 가지며 약 500pg입니다. 테스트의 선택에, 우리는 다른 효소와 감도에 따라 방법을 선택할 수 있으며, 에이전트의 접촉을 피하기 위해 작업에주의.


소주 yacoo 과학 공동으로 편집.

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