핵산은 디옥시리보 핵산 (dna) 및 리보 핵산 (rna)을 포함하며, 유전 정보를 갖는 생물학적 거대 분자의 부류이다. 그 연구는 자유로운 dna가 또한 매우 중요한 유전 정보를 포함한다는 것을 발견했다. 따라서 최근에 무료 dna 연구는 유전체 분자 진단 연구의 뜨거운 분야가되었으며 종양의 초기 진단부터 치료 및 개발까지 모든 단계에 점차적으로 적용되었습니다. 그러나, 자유로운 dna의 추출 기술은 여전히 ​​더 개선을 필요로합니다.

연구진은 기존의 자유 핵산 추출법에서 유기 용매가 특정 독성을 가지고 있다는 기술적 인 문제를 해결하기 위해 유리 DNA 추출 및 농축 키트와 자유 DNA 추출 방법을 개발했다.

무료 DNA 추출 및 농축 키트

키트에는 샘플 용 해물, 결합 용액, 1 차 세척, 2 차 세척, 용리액 및 나노 자기 비드가 포함됩니다 :

• 샘플 용 해물 성분은 핵산 분해 효소가없는 물, 시약 a 및 시약 b를 포함한다. 시약 a는 구 아니 디늄 이소 티오 시아 네이트, 염산 구아니딘 , 요오드화 나트륨 및 과염소산 나트륨. 시약 b는 tween20, triton-x100, sds, np40 및 폴리 옥시 에틸렌 계 비이 온성 계면 활성제 중 하나 이상;
• 샘플 용 해물의 성분에 추가하여, 결합 용 용액은 또한 이소프로판올 및 절대 에탄올 중 하나 이상인 시약 c;
• 1 차 세척 용액의 조성은 혼합 된 용액과 동일하다;
• 제 2 세정액은 핵산 분해 효소가없는 물, 0.1 ~ 1m 염화나트륨 용액의 몰 농도, 트리스 완충액 또는 테프 완충액 중 하나이며;
• 용리액은 핵산 분해 효소가없는 물, 트리스 완충액 또는 테 완충액 중 하나입니다.
• 나노 자성 비드의 자기 코어는 Fe-Co-Niox이다. 입자 크기 분포는 300-400nm이다. 자기 코어의 표면층은 적어도 탄소 층과 무기 실리카 층이 내부에서 외부로 코팅되어있다. 폴리에틸렌 글리콜은 최 외부 층 상에 공유 결합으로 그라프 트된다.

유리 염료 추출법

• 프로 테아 제 K를 먼저 첨가 한 다음 샘플을 첨가하고 용해 액 서열을 원심 분리 튜브에 넣고 흔들어 부화시켜 시료 용해를 수행하십시오.
• 나노 자기 비드 및 결합 용액은 나노 비드 결합 용액을 형성하도록 비례한다.
• 샘플에 준비된 나노 자석 비드 결합 용액을 첨가하고, 흔들어 혼합하고, 상등액을 버린다;
• 세척 용액으로 유리 염료를 씻어 라.
• 2 차 세척 용액으로 유리 염료를 세척하십시오.
• 용리액을 넣고 흔들어서 나노 비즈를 재 정지시키고 추가로 흔들어 나노 리본상의 자유로운 dna를 용리하십시오.

이 방법은 실험자의 손상을 최소화하고 현대 환경 보호 개념을 완전히 준수하며 임상 적 사용 조건을보다 잘 충족시키기 위해 전통적인 방법으로 벤젠 및 클로로포름과 같은 독성 시약을 사용하지 않습니다. 용해, 변성 및 핵산 농축의 증진과 관련하여, 대부분의 샘플은 프로 테이나 제 k 및 샘플 용 해물의 추가 사용을 필요로하지 않는다; 실온에서 모든 결합, 세척 및 용출 공정을 위해 시간이 덜 들고 조작하기 쉽습니다.

참고

무료 DNA 추출 및 농축 키트 및 무료 DNA 추출 방법. cn109913447a, 2019-06-21.

에 의해 편집 됨 소주 yacoo 과학 공동., 환영합니다.