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hepes의 준비 및 응용 2017-12-29 16:13:02


생화학 실험에서 완충 용액은 소량의 강한 산과 알칼리의 영향에 저항 할 수있는 필수 불가결 한 역할을하며 생리 학적 환경에 가장 가까운 ph 값을 유지합니다. 완충제 hepes - 다양한 생화학 반응에 사용할 수있는 6.8 ~ 8.2의 유효 완충 범위를 갖는 양성 유기 화학 완충제. 그것은 organelles 및 고도로 변성 ph - 민감한 단백질과 효소뿐만 아니라 생화학 진단 키트, dna / rna 추출 키트 및 pcr 진단 키트의 연구에 일반적으로 사용됩니다.



다음, 어떻게 준비하고 hepes 사용 ( 4- (2- 히드 록시 에틸) -1- 피페 라진 에탄 술폰산 )?


hepes 완충 용액 준비에 관해서는 별도의 문서에서 다른 견해가 있습니다. 응용 프로그램에 따라 하나는 hepes + naoh이고 다른 하나는 hepes + salt입니다. 구체적인 방법은 다음과 같이 요약됩니다.


(1) 1m hepes + naoh, ph = 7.0 (500 ml)


헤이페 119.15g을 증류수 400ml에 녹인 다음 0.5 ~ 1m의 naoh 수용액을 가하여 ph를 조절 한 후 증류수로 500ml로 희석하여 4 ℃에서 보관한다.


(2) hepes + salt (500 ml)


hepes 6.5g, nacl 8.0g, na 2hpo 4 • 7h 2o 0.198g, ph 값을 0.5m naoh 수용액으로 조절하여 500ml로 희석한다.



hepes를 사용하는 두 가지 방법이 있습니다. cas : 7365-45-9 ) :


(1)을 요구 농도에 따라 첨가하면 배양액에 직접 첨가 한 다음 여과 및 살균 할 수 있습니다 : 2.38g hepes을 각 1000ml 배지에 첨가하고 1n naoh로 ph를 7.2로 조정하고 여과하고 살균하십시오. hepes의 농도는 10mmol / l입니다.


(2) 100x 스톡 용액 (1mol / l)을 준비하고, 99ml 배양액과 1ml 스톡 용액을 취하고, 최종 적용 농도는 여전히 10mmol / l이다.


헤파 (hepes 모델 번호 : q0005 )는 좋은 완충제에 속하고 물에 대한 높은 용해도, 막 비 투과성, 내 화학성 및 효소 분해 저항성을 가지며 금속 이온과 결합하지 않습니다. 그러나 hepes의 최종 농도는 10 ~ 50mmol / l이다. 정상적인 상황에서 hep 20 밀리몰 / l의 버퍼링 효과를 얻을 수 연구자는 상용 hepes와 실제 상황에 따라 솔루션을 준비해야합니다.



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