(1) 준비헤파

합성노선

• 화합물 1의 합성

피페 라진 6 수화물을 원료로 사용하여 에탄올에 녹여 투명 용액을 만든 다음 80 ℃에서 환류시키면서 에틸렌 옥사이드를 넣었다. 일단 반응이 완료되면, 에탄올을 감압하에 증류 제거하고, 잔류 물을 분리기진공 분별 증류로 정제하고, 125 ~ 127 ℃의 증류 액을 수집 하였다 (화합물 1).

• 화합물 2의 합성

먼저, 무수 아 황산나트륨 및 물을 플라스크에 첨가하고, 혼합물을 수조에서 가열 하였다. 온도가 90 ℃에 도달하면 1,2- 디클로로ane을 적가하고, 환류를 계속 하였다. 반응 액을 70 ℃의 수욕 중에서 감압 농축하여 백색 고체를 얻고, 95 % 에탄올에 현탁하고, 가열 환류하고, 여과하여 불용 물을 제거 하였다. 상등액을 0 ℃에서 밤새 방치 하였다. 백색 박편 결정을 부 흐너 깔때기를 사용하여 흡입 여과에 의해 수집 하였다.

• 합성헤르페스의cas 7365-45-9)

화합물 1, 2 및 물을 플라스크에 넣고 무색 투명한 용액 (ph & gt; 13)이 될 때까지 교반 한 후, 오일 배스에서 110 ℃ ~ 115 ℃에서 외부 배양 하였다. 20 분 동안 교반하고, 반응 용액의 pH를 9로 점차 감소시키고, 5n 수산화 나트륨을유지하다반응 용액의 pH가 9 내지 10 사이 일 때, 수산화 나트륨을 멈추고 반응이 완료 될 때까지 환류를 계속한다.

냉각 된 반응 용액을 물로 희석하고 이온 교환 수지 [h +] * 컬럼으로 정제 하였다. 크로마토 그래피에 의해 얻어진 수집 된 용액감압하에 농축시키고,이어서 여과하고 증발시켰다. 무색 투명 투명한 용액을 두꺼운 시럽으로 농축시키고, 95 % 에탄올에 붓고, 빙초산으로 pH를 5로 조정 한 후, 즉시 절대 에탄올을 첨가하여 백색 결정을 침전시키고, 실온에서 자연 냉각시킨 후, 0 ° 밤새도록.

뷰 흐너 깔때기를 사용하여 흡입 여과에 의해 결정을 수집하고 얼음 냉각 된 에탄올로 세척 하였다. 세정 된 결정을 95 % 에탄올에 현탁시키고, 75 ℃로 가열하고, 물을 적가하여 그들을 완전히 용해시켰다. 고온 여과 후, 상청액에 무수 에탄올을 첨가하고, 자연 냉각시켜 흔들어 섞어서 백색 결정을 느슨한 형태로 침전시킨다. 0 ° C에서 끝내라.ht.

결정을 흡입 여과에 의해 수집 하였다뷰 흐너 깔대기를 사용하여 냉각시키고, 얼음으로 냉각시킨 무수 에탄올로 세척하고, 80 ℃에서 건조시켜 생성물을 수득 하였다.

(2) hepes 완충제 준비

앱에 따라lication, hepes + naoh 및 hepes + salt가 일반적으로 사용됩니다.

• hepes + naoh (500 ml) : 119.15g hepes을 400ml 증류수에 녹이고 0.5 ~ 1m의 naoh 수용액을 가하여 ph를 조절 한 후 증류수로 500ml로 만든다.
• hepes + salt (500ml) : hepes 6.5g, nacl 8.0g, na 2hpo 4 7h 2o 0.198g, 0.5m naoh 수용액으로 ph를 조절하여 500ml로한다.

교류lepe-zuniga et al.의보고에 따르면, hepes은 과산화수소의 생성에 의해 주변 광에 노출 될 때 광독성을 갖는다. 따라서 hepes 함유 용액을 가능한 한 어둡게 보관하는 것이 좋습니다.