트리스 (하이드 록시 메틸) 아미노 메탄(트리스) 완충액은 생물학적 시약이며, 생물학적 제제 및 의학적 준비에 일반적으로 사용되는 완충액이다. 그것은 일반적으로 사용됩니다 : 겔 전기 영동 버퍼, 예 : tae 또는 tbe; laemmli 버퍼의 준비; 실행 버퍼 및 로딩 버퍼를 글리신 및 SD와 함께 준비; 음이온 교환 크로마토 그래피에서의 결합 버퍼 및 용리액; rna 하이브리드 화 및 dna 절단. 아래에서 우리는 tris를 이용한 rna 실험을위한 완충액의 사용법을 소개 할 것입니다.
(10 ×)
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시약 |
수량(1.0 ml 용) |
최종 농도 (10 ×) |
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트리스 - hcl (1 m, ph 8.0) |
500 μl |
0.5 M |
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mgcl2 (1 엠) |
150 μl |
0.15 M |
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디티 오 트레이 톨 (dtt) (0.5 엠) |
66 μl |
33 mm |
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h2영형 |
284 μl |
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(2 ×)
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시약 |
수량 (1.0ml) |
최종 농도 (2 ×) |
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atp (100 mm) |
10 μl |
1 mm |
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tris-hcl (1 m, ph 8.0) |
200 μl |
200 mm |
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mgcl2 (1 엠) |
20 μl |
20 mm |
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dtt (1 엠) |
6.6 μl |
6.6 mm |
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dmso |
200 μl |
20 % (v / v) |
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글리세롤 (초순수) |
300 μl |
30 % (v / v) |
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h2영형 |
~ 1 ml |
- |
tris-hcl (10 mm, ph 7.6)
에다 (1 mm)
나트륨 도데 실 설페이트 (dds) (0.5 %, w / v)
3. rna 바인딩
1 x 트리스 완충 식염수 (tbs)
0.05 % 트윈 20
2 mm mgcl2 (rnase-free)
10 mm 트리스 (ph 7.5, rnase-free)
137 mm nacl (rnase-free)
3 mm kcl (rnase-free)
2 mm mgcl2 (rnase-free)
2 % 소 혈청 알부민 (bsa)
10 ㎍ / ml ssdna
10 μg / ml 누룩 트라ssdna와 yeast trna를 제외한 모든 성분을 합친다.
효모 rna에 대한 용해 버퍼
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시약 |
수량 (100 ml 용) |
최종 농도 |
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tris-hcl (1 m, ph 6.8) |
5 ml |
50 mm |
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nacl (1 엠) |
10 ml |
100 mm |
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에다 (0.5 m, ph 8.0) |
2 ml |
10 mm |
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ddh2영형 |
~ 100 ml |
- |
5. rna 어닐링 버퍼 (10x)
0.5 m nacl
100 mm 디티 오 트레이 톨
100 mm mgcl2
100 mm tris-hcl (ph 7.5)
6. rna 전사 버퍼
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시약 |
추가 할 금액 |
최종 농도 |
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mgcl2 (1m) |
300 μl |
30 mm |
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nacl (5m) |
100 μl |
50 mm |
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스 페르미 딘 (1m) |
100 μl |
10 mm |
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트리스 -hcl (1m) (ph 7.9) |
2 ml |
200 mm |
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h2o, nuclease-free |
7.6 ml |
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7. rna 폴리 메라 이제 (5 ×)에 대한 전사 버퍼
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시약 |
수량 (10 ml 용) |
최종 농도 |
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tris-hcl (1 m, ph 8.0) |
2 ml |
200 mm |
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mgcl2 (1 엠) |
400 μl |
40 mm |
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nacl (5 엠) |
0.5 ml |
250 mm |
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스 페르미 딘 (100 mm) |
1 ml |
10 mm |
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h2영형 |
6.1 ml |
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트리스를 사용할 때는 트리스 완충액의 pH가 온도와 농도에 크게 영향을 받기 때문에 준비 과정에서 환경을 고려해야한다.
에 의해 편집 됨소주 yacoo 과학 공동., 환영합니다.
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