생화학 실험에서 완충 용액은 필수적인 역할을하며 소량의 강산 및 알칼리 효과에 저항 할 수 있고 ph 값을 시스템의 생리 환경에 가장 가깝게 유지할 수 있습니다. 헤파 버퍼 및 트리스 버퍼는 일반적으로 생물 학적 실험 완충제에 사용되며, 많은 사람들은 종종 의심을 가지고 : 둘 사이의 차이점은 무엇입니까? 이 기사는 비교 요약 일 것이다.

소개 및 적용

hepes은 좋은 양의 완충액에 속하는 양성 이온 성 생물 완충액이며 유효 완충 범위는 6.8-8.2이며 다양한 생화학 반응 및 일부 세포 배양 배지에서 완충제로 널리 사용될 수 있습니다. hepes의 최종 농도는 10 ~ 50mmol / l이며, 20mmol / l를 함유하는 일반적인 배양액은 완충력을 얻을 수있다. 또한 hepes 완충제는 생화학 진단 키트, dna / rna 추출 키트 및 pcr 진단 키트는 물론 오르간 및 단백질 및 효소 (mutability 및 ph-sensitivity)를 보유하고 있습니다.

트리스 버퍼 : 트리스는 약 알칼리, pka는 25 ℃에서 8.1, 유효 완충 범위는 7.0 ~ 9.2이며, 생화학 실험에서 일반적으로 사용되는 pH는 6.8, 7.4, 8.0, 8.8이었다. 그것은 전기 영동 및 겔 실험에서 또는 핵산 및 단백질 용매로서 완충액으로 사용되며 중간 섬유 선모를 형성한다. 파생 된 버퍼 인 te, tae, tbe 등은 DNA 안정성, 저장 및 추출에 일반적으로 사용됩니다.

2 개의 버퍼의 특성

hepes 버퍼 및 모든 good 버퍼에도 다음과 같은 특징이 있습니다.

pka 값은 6.0에서 8.0 사이입니다.

물에 대한 높은 용해도;
멤브레인 비 침투성, 쉽게 biofilm을 침투하지;

생화학 반응에 대한 영향은 제한적이며, 화학적 작용 및 효소 적 가수 분해에 내성을 가질 수 있으며, 금속 이온과 착물 또는 침전을 생성하지 않는다;

이온 농도, 용액 조성 및 온도는 해리에 거의 영향을 미치지 않는다.

트리스 완충 용액은 다음과 같은 특성을 갖는다 :

환경에 의해 영향을받으며 일반적으로 온도가 1 ° C 올라갈 때 ph는 0.03으로 감소합니다. co2를 쉽게 흡수합니다.

완충액 제조 ​​방법

응용 프로그램에 따라 hepes 완충 용액의 준비, 하나는 순수한 hepes + naoh이고 다른 하나는 hepes + salt입니다.

hepes 6.5g, nacl 8.0g, na 2hpo 4? 7h 2o 0.198g, 0.5m naoh 수용액으로 ph를 조절하여 500ml로 만든다.

트리스 - hcl 버퍼의 준비를위한 두 가지 방법이 있습니다 :

1 l 0.1 mol / l tris-hcl 완충액의 경우 : 트리스 염기 12.11 g을 950 ~ 970 ml의 탈 이온수에 녹인 후 4N HCl을 교반하면서 적가 한 후 물을 가하여 그것 1l.

요약하면, hepes 및 tris 완충액은 완충 범위, 적용 분야 및 특성 및 제조 방법에 차이가 있습니다. 특정 실험에서, 실험 조건은주의 깊게 분석되어야한다. 또한, 이온 교환 크로마토 그래피에서 양이온 교환 컬럼을 사용하면 양전하를 띠기 때문에 트리스 완충액을 피해야하고 hepes은 양성 이온 완충액에 속하며주의와 음이온 이온 교환 크로마토 그래피가 모두 적용 가능하다는 점에 유의해야한다.